對了解PCR實(shí)驗室的人都知道,PCR實(shí)驗室是利用聚合酶鏈鎖反應擴增特定的DNA片段,這種方法可在生物體外進(jìn)行,不必依賴(lài)大腸桿菌或酵母菌等生物體。而PCR這項技術(shù),也被廣泛地運用在醫學(xué)和生物學(xué)的實(shí)驗室。也因此PCR實(shí)驗室對潔凈要求也相對于一般的實(shí)驗室要求更加嚴苛。
PCR實(shí)驗室潔凈主要是通過(guò)人為的手段,應用潔凈技術(shù)實(shí)現控制室內空氣中塵埃、含菌濃度、溫濕度與壓力、以達到所要求的潔凈度、溫濕度和氣流速度等環(huán)境參數。這樣就能保證實(shí)驗結果的精確性也讓工作人員遠離可能存在的傳染等。PCR實(shí)驗室潔凈要求一般實(shí)施兩級隔離,一級隔離通過(guò)生物安全柜、負壓隔離器、正壓防護服、手套、眼罩等實(shí)現;二級隔離通過(guò)實(shí)驗室的建筑、空調凈化和電氣控制系統來(lái)實(shí)現。
但由于PCR實(shí)驗室凈化空調需要風(fēng)量小,為了安全起見(jiàn)風(fēng)量都按大的估算,一般都要超過(guò)規范規定,現今專(zhuān)門(mén)有PCR實(shí)驗室凈化空調機組,可以直接利用解決。而一般PCR實(shí)驗室都裝備有:超凈工作臺、生物安全柜、邊臺或不銹鋼操作臺、洗滌臺等。PCR實(shí)驗室通常也會(huì )化分成四個(gè)區域,即:試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產(chǎn)物分析區(如使用全自動(dòng)分析儀,區域可適當合并)。
進(jìn)入各個(gè)區域必須嚴格按照單一方向進(jìn)行,不同的工作區域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開(kāi)時(shí),不得將工作服帶出。 試劑儲存和準備室(標本制備區),儀器主要配置有:冷凍離心機、生物安全柜、冰箱、可移動(dòng)紫外燈、全自動(dòng)力核酸蛋白純化儀、專(zhuān)用工作服和工作鞋等。擴增反應混合物配制和擴增區配置有:冰箱、高速離心機、超凈工作臺、PCR儀(要求負壓狀態(tài))、可移動(dòng)紫外燈、微量加樣器、核酸擴增儀等。擴增產(chǎn)物分析區主要配置有:移液器、振蕩器、超凈工作臺、毛細管電泳儀、冰箱、離心機、微量加樣器、可移動(dòng)紫外燈等。